Bt基因核酸檢測(cè)試劑盒是針對(duì)轉(zhuǎn)基因抗蟲作物中廣泛使用的cry1Ab、cry1Ac等Bt靶標(biāo)基因開發(fā)的檢測(cè)試劑，核心采用熒光PCR法，可快速篩查樣本中是否含有轉(zhuǎn)基因抗蟲成分，僅用于科研場(chǎng)景，不可用于臨床診斷。
 

　　一、核心基礎(chǔ)信息
 

　　‌檢測(cè)靶標(biāo)‌：以蘇云金芽孢桿菌來(lái)源的cry1Ab、cry1Ac基因?yàn)楹诵臋z測(cè)對(duì)象，覆蓋玉米、水稻、棉花等常見轉(zhuǎn)基因抗蟲作物。
 

　　‌適用樣本‌：可檢測(cè)農(nóng)作物植株、米粉、面粉、豆制品、米制品、嬰幼兒輔食、罐頭食品、植食性飼料等多種基質(zhì)的樣本。
 

　　‌性能參數(shù)‌：檢測(cè)限低至0.1%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))，部分高靈敏度款可達(dá)10拷貝/反應(yīng)，能識(shí)別微量的轉(zhuǎn)基因摻雜，特異性強(qiáng)，可區(qū)分高度同源的基因序列。
 

　　‌保存條件‌：需在-20℃避光密封保存，避免反復(fù)凍融，常規(guī)規(guī)格為48T或50T，不同品牌產(chǎn)品有效期多為12個(gè)月。
 

　　二、操作與結(jié)果判讀
 

　　樣本制備：從待檢樣本中提取基因組DNA，保證DNA純度達(dá)標(biāo)、濃度適宜。
 

　　試劑配制與加樣：將DNA模板加入預(yù)混的PCR反應(yīng)液中，同步設(shè)置陰性對(duì)照(無(wú)菌水)和陽(yáng)性對(duì)照(含Bt基因的質(zhì)粒)。
 

　　擴(kuò)增程序：95℃預(yù)變性5-10分鐘，隨后40個(gè)循環(huán)：95℃15秒→60℃30-60秒(收集熒光)。
 

　　結(jié)果判定：Ct值≤35-36且擴(kuò)增曲線呈典型S型為陽(yáng)性；Ct值≥40或無(wú)Ct值為陰性；Ct值在36-40區(qū)間為可疑，需重復(fù)檢測(cè)確認(rèn)。
 

　　三、關(guān)鍵注意事項(xiàng)
 

　　Bt基因核酸檢測(cè)試劑盒該試劑盒屬于初篩類試劑，若檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，需進(jìn)一步使用品系特異性試劑盒確認(rèn)具體的轉(zhuǎn)基因品系。

 

　　操作需嚴(yán)格分區(qū)，使用帶濾芯的吸頭，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后用10%次氯酸或75%酒精對(duì)工作臺(tái)進(jìn)行消殺，避免氣溶膠污染導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。
 

　　不同批號(hào)的試劑不可混合使用，需在有效期內(nèi)完成檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢棄物需按生物安全規(guī)范妥善處理。